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Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales

Medicina Veterinaria y Zootecnia · 2019

Análisis molecular del gen SLA-DRB1 en una pòblación de porcinos en la sede Remanso - UDCA

Martínez Benavides, Nidia AlejandraAsesor: Celis Giraldo, Carmen Teresa, dir. · Moreno Pérez, Darwin Andrés, dir.

Introducción: El complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) juega un papel importante en la respuesta de patógenos y control de autoinmunidad. Este se divide en clase I y II y consiste en un conjunto de genes que codifican glicoproteínas de superficie de membrana llamadas antígenos leucocitario porcinos o SLA. En la clase II, el SLA-DR y SLA-DQ son funcionales y se encargan de presentar péptidos exógenos a las células T CD4+. Específicamente, el antígeno leucocitario porcino (SLA) es una molécula codificada por el gen SLA-DRB1, la cual tiene una función importante en la respuesta vacunal y en resistencia a enfermedades. En esencia, estas proteínas ayudan al sistema inmunitario a diferenciar entre sus propias células y sustancias extrañas, asegurando así, una respuesta capaz de defender al organismo. La presente investigación se enfocó en el análisis del complejo mayor de histocompatibilidad clase II (MHC-II), específicamente el gen DRB1 en la población de porcinos de la sede el Remanso U.D.C.A. Considerando que en esta sede la población estudio es derivada de líneas comerciales (en su mayoría SuperMom 52 (SM52)) y teniendo en cuenta que en Colombia no se han realizado estudios de tipificación de SLA DRB1 (exón II), con este trabajo se realizó una primera exploración de este gen con el fin de conocer los polimorfismos presentes en la población estudio. Materiales y métodos: Se tomó muestra de sangre venosa a 31 animales y se realizó extracción de ADN utilizando un kit comercial. Posteriormente, se amplificó un fragmento de 328 pb para el gen DRB1 usando PCR convencional. Como control interno se amplificó el gen (α-Actin) de 498 pb. Los amplicones fueron purificados y enviados a secuenciar, los resultados fueron analizados por métodos bioinformáticos. Como método adicional se realizó clonación molecular. Resultados y discusión: Se obtuvo 31 secuencias referentes a cada individuo muestreado. Los alelos encontrados fueron DRB1*10:01:01, DRB1*10:01:02, DRB1*01:01, DRB1*01:02, DRB1*02:01:01, DRB1*06:01. En los cerdos de las líneas SuperMom 52, Línea 410 PIC y Cruce SM52 x 410 PIC estudiados en este trabajo se encontró que el alelo DRB1*10:01:01 tuvo una frecuencia del 58.52% de la totalidad de los alelos encontrados, siendo así, el alelo más común en la población (24/31 animales). Además, se encontró un porcentaje alto de individuos homocigotos 67.74% (21/31 animales) frente a un porcentaje de individuos heterocigotos 32.25% (10/31 animales). Los datos anteriores arrojaron un alto grado de consanguinidad en la población, sin embargo, se requiere de un estudio genético más profundo. Conclusiones: 1. La información obtenida en este trabajo es esencial para comprender la frecuencia alélica del gen SLA-DRB1 en la población de cerdos de la sede el remanso de la U.D.C.A y, por lo tanto, será útil para profundizar en el estudio de la respuesta inmune y desarrollar vacunas alternativas para los nuevos retos epidemiológicos de la población. 2. El alelo con mayor frecuencia fue el DRB1*10:01:01 (24/31 animales), que, junto con la proporción de individuos homocigotos dan un panorama general del nivel de diversidad genética en cuanto al sistema inmune de la población estudio. 3. A pesar de que el método molecular no arrojo los resultados esperados, es el primer acercamiento a la clonación celular del gen SLA DRB1 (exón II) en la especie porcina colombiana.

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