Química Farmacéutica · 2019
Estudio de efecto vasorelajante del extracto etanólico Campanula medium aislamiento biodirigido del compuesto activo y posible mecanismo de acción
Cardiovascular disease is a health problem worldwide. In Colombia, there is a 45% prevalence of hypertension, associated complications such as heart failure, coronary ischemia multifactorial where the risk factor is one of the highest of Latin American countries. The use of pharmacological treatments has been shown to reduce morbidity and mortality from cardiovascular disease, reducing complications associated with hypertension. For this reason today the search for new alternatives continues with antihypertensive potential; in these order natural products as a source for obtaining biological active molecules are explored. Previous studies have shown that members of the bellflower family have potentially beneficial cardiovascular level activities with antioxidant and / or anti-inflammatory. Therefore the aim of this study was to evaluate the vasorelaxant effect of medium C. in an assay by bioassay-guided technique isolated organ in rat aortic rings, characterize the compound of greater activity and suggest a possible mechanism of action.(He et al., 2014) The results showed that the hydroalcoholic extract of Campanula medium CmXO had two compounds vasorelaxant effect endothelium-dependent. Solubility by a method of solvent and column chromatography and Sephadex LH-20 reverse phase RP18 was achieved isolate two compounds; an already known and reported in the literature as routine and a diterpene named by us as CmE1B, the latter the largest vasorelaxant activity. This compound was characterized qualitatively by thin layer chromatography and then analyzed by NMR and H-1 and C-13 NMR was determined that a diterpene type labdane dihydroxyl. By isolated organ technique it determined that CmE1B has an endothelium-dependent vasorelaxant activity, acting primarily via the nitric oxide and cGMP and through the activation of K + channels dependent Ca2 + in endothelial cells
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Contenido
- RESUMENp. 16
- INTRODUCCIÓNp. 18
- 1. OBJETIVOSp. 20
- 1.1 Objetivo Generalp. 20
- 1.2 Objetivos específicosp. 20
- 2. MARCO TEÓRICOp. 21
- 2.1 Definiciónp. 21
- 2.4 Mecanismo contráctil en la musculatura lisap. 23
- 2.5 El endotelio vascularp. 26
- 2.7 Disfunción endotelial y estrés oxidativop. 28
- 2.7 Participación de los receptores acoplados a proteína G en el musculo liso vascularp. 29
- 2.7.1 Adrenoreceptoresp. 30
- 2.7.2 Receptores Muscarínicosp. 30
- 2.7.3 Receptores purinérgicosp. 31
- 2.8 Función de los canales de potasio y su relación con la Hipertensión Arterialp. 32
- 2.9 La investigación de productos naturales en el tratamiento de la Hipertensión Arterialp. 32
- 3. METODOLOGÍAp. 37
- 3.1 Material Vegetalp. 37
- 3.2 Preparación del extracto etanólico de Campanula mediump. 37
- 3.3 Ensayo Biodirigidop. 38
- Campanula mediump. 20
- 3.3.1.1 Método de solubilidad por solventes orgánicop. 38
- 3.3.1.2 Cromatografía de capa fina (CCF)p. 39
- 3.3.1.4 Análisis espectroscópicosp. 40
- 3.3.2 Evaluación de la actividad vasorelajantep. 40
- 3.3.2.1 Ensayo biológico ex vivo, mediante la técnica de órgano aisladop. 41
- 3.3.2.2 Consideraciones Éticasp. 42
- 3.3.2.3 Análisis de los datosp. 42
- 4. RESULTADOSp. 44
- 4.1 Actividad Vasorelajante del extracto CmXOp. 43
- 4.2 Fraccionamiento del extracto etanólico CmXOp. 44
- 4.3 Actividad vasorelajante de las fracciones obtenidas a partir del extracto CmXOp. 45
- 4.4 Separación e identificación del compuesto activo de la fracción CmE2p. 47
- 4.5 Separación e identificación del compuesto activo de la fracción CmE1p. 51
- 4.6 Caracterización espectroscópica del compuesto CmE1B1p. 53
- 4.7 Evaluación farmacológica del efecto vasorelajante del compuesto CmE1B1p. 55
- 4.8 Mecanismo de acción de la vasorelajación inducida por CmE1B1p. 57
- 4.8.1 Participación de los factores derivados de endotelio597
- 4.8.2 Participación del GMPc como segundo mensajerop. 59
- 4.8.3 Participación de los receptores muscarínicos, β-adrenérgicos y purnérgicop. 58
- 4.8.4 Participación de los canales de potasio (K+V, KATP, KCa2+)p. 60
- 4.8.5 Participación de Canales de calcio tipo L y Receptores rianodinap. 61
- 5. DISCUSIÓNp. 64
- 5.1 Efecto vasorelajante endotelio dependiente del extracto, fracciones de C. mediump. 63
- 5.2 Flavonoides de la fracción CmE2, efecto vasorelajante dependiente de endoteliop. 63
- 5.3 Efecto vasorelajante de un diterpeno tipo labdano de CmE1B1p. 65
- CmE1B1p. 55
- 5.5 CmE1B1 como antagonismo no competitivo en los adrenoreceptores αp. 66
- 5.6 Respuesta vasorelajante endotelio dependiente diterpeno tipo labdano de CmE1B1677
- 5.7 Participación de la respuesta vasorelajante de EDRF, Óxido nítrico y Prostaciclinas688
- 5.8 Vasorelajación inducida vía NO/GMPcp. 68
- endotelio-dependiente700
- CONCLUSIONESp. 73
- RECOMENDACIONESp. 74
- BIBLIOGRAFÍAp. 75
- ANEXOSp. 84
- Anexo 1: Procedimiento Experimentalp. 84
- 1.2 Condiciones de estabilización del tejidop. 84
- 1.3 Evaluación de la viabilidad del endoteliop. 85
- 1.4.1 Cálculo de la concentración efectiva mediap. 87
- CmE1B1p. 55
- Nitroprusiato de sodiop. 87
- 1.5.4 Evaluación de la participación del GMPc en el efecto relajante del compuesto CmE1B1p. 87
- y purinérgico en el efecto relajante del compuesto aislado de CmE1B1p. 88
- de CmE1B1p. 88
- relajante del compuesto aislado de CmE1B1p. 90
- 1.6 Caracterización espectroscópica del compuesto: Espectro RMN H-1 de CmE2B1p. 92
- 1.7 Caracterización espectroscópica del compuesto: Espectro RMN H-1 de CmE2B1p. 93
- CmE2B1p. 94
- Principales receptores acoplados a proteína G y ligandos que los activanp. 24
- quimicap. 32
- Figura 5. Estructura del Ostole aislado de Angelica pubescens344
- Figura 10. Método de solubilidad en solvente orgánico……….........…………………………………p. 38
- técnica de órgano aisladop. 40
- técnica de órgano aisladop. 41
- Cada punto representa el promedio de 5 réplicas ± EEM……..……………………………………p. 43
- Figura 14. Fracciones analizadas por CCF………………………………………………………………p. 44
- Figura 18. Espectro HSQC de CmE2B1p. 49
- Figura 19. Espectro HMBC de CmE2B1p. 50
- precontraidos con Fenilefrina (3x10-6 M) y KCI (10 µg/mL)p. 56
- presencia del compuesto CmE1B1 (10 µg/mL)577
- con FE (1X10-6 M)p. 61
- Tabla 1. Reactivos para la caracterización cualitativa de metabolitos secundariosp. 40
- Tabla 2. Rendimiento del fraccionamiento del extracto etanólico de Campanula mediump. 45
- Anexo 1. Procedimiento Experimentalp. 82
- Anexo 2: Caracterización espectroscópica del compuesto: Espectro RMN H-1 de CmE2B1p. 92
- Anexo 3: Caracterización espectroscópica del compuesto: Espectro RMN H-1 de CmE2B1p. 93
- CmE2B1p. 94