Química Farmacéutica · 2018
Estudio fitoquímico de la especie vegetal Bucquetia glutinosa (L.f.) DC (Melastomataceae) y evaluación de su actividad biológica
Thanks to the biodiversity presented by the plants and the multiple benefits attributed to them, they have become a source of important studies for worldwide development. In this research study we wanted to identify the metabolites present in the crude extract of the plant species Bucquetia glutinosa (Melastomataceae), as well as its toxicity in order to establish a potential use of this species. Bioassays were carried out with four fractions of the crude extract (ethanolic, butanolic, chloroformic and hexane) using four microorganisms (S. aureus, E. coli, Klebsiella sp and candida sp) to determine the biological activity that could occur B. glutinosa. According to the in vitro tests, it was identified that the endemic species of the city of Bogotá presents secondary metabolites such as alkaloids, triterpenoids and / or steroids, saponins, phenolics / tannins, flavonoids and quinones, which were identified by means of different tests. coloration and precipitation in a preliminary phytochemical analysis, an LC50 of 133,593 μg / mL was also determined, thus presenting a moderate degree of toxicity. The bioassays evaluated showed that the crude extract and its fractions of B. glutinosa show high activity against S. aureus bacteria, intermediate activity against yeast Candida sp and null activity against E. coli and Klebsiella sp. By determining the minimum inhibitory concentration, it was observed that the minimum concentration that inactivates the microorganism is 30mg / ml and the bioautography test concluded that phenolic compounds, flavonoids and tannins may be responsible for the antibacterial activity that it was evidenced in this research project.
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Contenido
- 1. INTRODUCCIÓNp. 11
- 2. OBJETIVOSp. 14
- 2.1 Objetivo Generalp. 14
- 2.2 Objetivos Específicosp. 14
- 3. MARCO TEÓRICOp. 15
- 3.1 Especies altoandinasp. 15
- 3.2 Familia Melastomataceaep. 16
- 3.3 Bucquetia glutinosa (L.F.) DCp. 18
- 3.4 COMPUESTOS ACTIVOS DE LAS ESPECIES VEGETALESp. 19
- 3.4.1 Alcaloidesp. 19
- 3.4.2 Glucósidos cardiotónicosp. 20
- 3.4.3 Triterpenoides y/o esteroidesp. 21
- 3.4.4 Taninosp. 21
- 3.4.5 Flavonoidesp. 22
- 3.4.6 Quinonasp. 23
- 3.4.7 Cumarinasp. 24
- 3.5 FUNDAMENTO DE TÉCNICAS DE EXTRACCIÓNp. 24
- 3.5.1 Extracción de metabolitos secundarios con solventesp. 24
- 3.5.2 Maceraciónp. 25
- 3.5.3 Extracción Soxhletp. 26
- 3.6 IDENTIFICACIÓN PRELIMINAR DE METABOLITOS SECUNDARIOSp. 26
- 3.6.1 Identificación de alcaloidesp. 27
- 3.6.2 Glucósidos cardiotónicosp. 20
- 3.6.3 Triterpenoides y/o esteroidesp. 21
- 3.6.4 Taninosp. 21
- 3.6.5 Fenolesp. 30
- 3.6.6 Flavonoidesp. 22
- 3.6.7 Quinonasp. 23
- 3.6.8 Cumarinasp. 24
- 3.7 Cromatografía en Capa Fina (CCD)p. 32
- 3.8 EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD BIOLOGICAp. 32
- 3.8.1 Ensayo de Toxicidadp. 33
- 3.8.2 Ensayo de letalidad con Artemia salinap. 34
- 3.8.3 Evaluación de la actividad antimicrobianap. 35
- 3.8.4 Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoriap. 36
- 3.8.5 Ensayos por bioautografíap. 36
- 3.8.6 Staphylococcus aureusp. 37
- 3.8.7 Klebsiella spp. 38
- 3.8.8 Escherichia colip. 39
- 3.8.9 Candida spp. 39
- 4. METODOLOGÍAp. 41
- 4.1 Material vegetalp. 41
- 4.2 Obtención del extracto etanólico o crudop. 41
- 4.3 Fraccionamiento de extracto etanólico o crudop. 41
- 4.4 Marcha fitoquímica preliminarp. 42
- 4.4.1 Alcaloidesp. 19
- 4.4.2 Glucósidos Cardiotónicosp. 20
- 4.4.3 Esteroidesp. 43
- 4.4.4 Carotenoidesp. 43
- 4.4.5 Saponinasp. 43
- 4.4.6 Taninosp. 21
- 4.4.7 Flavonoidesp. 22
- 4.4.8 Quinonasp. 23
- 4.4.9 Cumarinasp. 24
- 4.5 Ensayo de toxicidad frente a Artemia salinap. 45
- 4.6 Ensayos de actividad antimicrobianap. 46
- 4.6.1 Evaluación antimicrobianap. 47
- 4.6.2 Evaluación antifúngicap. 48
- 4.7 Concentración mínima Inhibitoriap. 48
- 4.8 Bioautografíap. 49
- 5. RESULTADOS Y DISCUSIÓNp. 51
- 5.1 Obtención del extractop. 51
- 5.2 Obtención de las fracciones a partir del extracto crudop. 51
- 5.3 Análisis fitoquímico preliminarp. 51
- 5.4 Ensayos de Toxicidadp. 54
- 5.5 Ensayos de Actividad Biológicap. 56
- 5.5.1 Tinción de Gram Candida spp. 56
- B. glutinosa frente a Staphylococcus aureusp. 59
- B. glutinosa frente a Candida spp. 61
- 5.6 Concentración Mínima Inhibitoriap. 48
- 5.7 Bioautografíap. 49
- 6. Conclusionesp. 66
- 7. Recomendacionesp. 67
- 8. Impacto Esperadop. 68
- 9. BIBLIOGRAFÍAp. 69
- 10. ANEXOSp. 79
- Tabla 1. Cantidad obtenida de cada fracción del extracto crudo con solvente…p. 51
- E.coli y Candida sp……………………………………………………………………p. 58
- y controles frente a Staphylococcus aureus……..…………………………………p. 60
- Figura 1. Distribución geográfica de la familia Melastomataceaep. 16
- Figura 2. Bucquetia glutinosa (L.F.) DC199
- Figura 3. Reacción de precipitación con reactivo de mayerp. 27
- formación de un precipitado naranja288
- Figura 5. Reacción de Baljet para detección de terpenos y esterolesp. 28
- esteroles a través de la formación de coloracionesp. 29
- Figura 7. Formación de complejo de fenoles con cloruro férrico acuosop. 30
- Figura 9. Reacción química de Borntragerp. 31
- Figura 10. Identificación de cumarinasp. 32
- Figura 11. Morfología de Artemia salinap. 34
- Figura 12. Montaje fraccionamiento por técnica Soxhletp. 42
- Figura 13. Montaje ensayo de toxicidad con Artemia salinap. 46
- Figura 14. Esquema del ensayo de la concentración mínima inhibitoria (CMI)p. 49
- Dosis Vs Porcentaje acumuladop. 56
- frente a S. aureusp. 61
- frente a Candida spp. 62
- Figura 19. Esquema del ensayo de la concentración mínima inhibitoria (CMI)p. 63
- frente a S. aureus. Volumen 10 µLp. 80
- frente a E.coli, volumen de 10 μLp. 80
- frente a E. coli, volumen de 20 μLp. 81
- frente a Klebsiella sp, volumen de 10 μLp. 82
- frente a Klebsiella sp, volumen de 20 μLp. 83
- preliminarp. 79
- antimicrobiana con Staphylococus aureusp. 80
- antimicrobiana con E. colip. 80
- antimicrobiana con Klebsiella spp. 82
- Anexo 5. Cromatografía en capa fina de la fracción butanólicap. 83