Especialización en Patología · 2026
Capacidad discriminativa del oncogén E7-VPH-AR en biopsias de cérvix con diagnóstico de Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC) tomadas en un centro de tamizaje de cáncer de cuello uterino del nororiente colombiano.
Introducción: El cáncer de cuello uterino es una causa importante de morbilidad y mortalidad, y está relacionado con la infección por VPH de alto riesgo. Aunque la biopsia es el estándar diagnóstico, puede no detectar todas las infecciones, lo que ha impulsado el uso de técnicas moleculares. Las pruebas basadas en PCR permiten identificar la infección viral y diferenciar genotipos de riesgo, constituyendo una alternativa diagnóstica potencialmente más sensible. Objetivo: Determinar la capacidad discriminativa de una qPCR dirigida al oncogén E7 del VPH de alto riesgo en biopsias cervicales con neoplasia intraepitelial cervical (NIC). Materiales y métodos: Estudio analítico en 63 biopsias con NIC 1, 2 y 3. El ADN se extrajo mediante salting out y se verificó con β-tubulina. La qPCR se realizó para 15 genotipos VPH-AR. Los datos citológicos, histopatológicos y moleculares se analizaron mediante estadística descriptiva y bivariada, estimando sensibilidad, especificidad, valores predictivos, likelihood ratios, AUC y concordancia diagnóstica. Resultados: La citología mostró sensibilidad de 88,9% y VPP de 66,6%. La qPCR-E7 presentó sensibilidad de 27,7% y especificidad de 75%, con concordancia mínima (κ=0,02). Tres genotipos mostraron carga viral detectable, principalmente en NIC3. Se evidenció degradación del material genético. Conclusiones: La qPCR-E7 tuvo bajo rendimiento, probablemente por degradación del ADN en muestras FFPE. Su mayor positividad en lesiones de alto grado sugiere utilidad potencial si se optimizan condiciones preanalíticas. La biopsia continúa como estándar diagnóstico.
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Contenido
- Introducciónp. 11
- 1. Planteamiento y justificación del problemap. 12
- 2. Marco teóricop. 14
- 2.1 Definición y epidemiologíap. 14
- 2.2 Factores de riesgop. 15
- 2.3 Virus del papiloma Humano (VPH)p. 15
- 2.4 Fisiopatologíap. 17
- 2.5 Diagnósticop. 18
- 2.6 Pruebas molecularesp. 20
- 2.7 qPCRp. 21
- 3. Pregunta de investigaciónp. 23
- 4. Hipótesis de investigaciónp. 23
- 4.1. Hipótesis nulap. 23
- 4.2 Hipótesis alternap. 23
- 5. Objetivosp. 24
- 5.1. Objetivo generalp. 24
- 5.2. Objetivos específicosp. 24
- 6. Propósitop. 24
- 7. Metodología propuestap. 25
- 7.1. Descripción del tipo del estudiop. 25
- 7.2 Poblaciónp. 25
- 7.3. Tamaño de la muestrap. 26
- 7.4 Selección de bloques de parafinap. 27
- 7.5 Definición de variablesp. 28
- 8. Procedimientos para la recolección de la informaciónp. 31
- 8.1. Materiales y métodosp. 31
- 8.1.1 Selección de bloques de parafinap. 27
- 8.1.2 Resultado de biopsia de cérvixp. 32
- 8.1.3 Recolección, transporte y almacenamiento de los bloques de parafinap. 32
- 8.1.4 Preparación y desparafinado de muestrasp. 33
- 8.1.5 Extracción de ADN para qPCRp. 34
- 8.1.6 qPCRp. 21
- 8.1.7 Cebadores para el gen E7 de VPH-ARp. 35
- 8.1.8 Control de extracción de ADNp. 37
- 8.2. Análisis estadísticop. 38
- 8.2.1 Análisis univariadop. 38
- 8.2.2 Análisis bivariadop. 38
- 9. Consideraciones éticasp. 38
- 10. Tratamiento de datos personalesp. 40
- 11. Resultadosp. 41
- 11.1 Análisis univariadop. 38
- 11.2 Análisis bivariadop. 38
- 11.3 Resultados qPCRp. 51
- 12. Discusiónp. 64
- 12.1 Rendimiento diagnóstico de la citología comparada con la biopsiap. 64
- 12.2 Desempeño de la qPCR dirigida al gen E7 del VPHp. 65
- 12.3 Relación entre carga viral y severidad histológicap. 66
- 12.4 Asociación entre variables sociodemográficas, citología, biopsia y PCRp. 67
- 12.5 Fortalezas del estudiop. 67
- 12.6 Limitaciones y posibles sesgosp. 68
- 12.7 Implicaciones clínicasp. 68
- 13. Recomendaciones para futuros estudiosp. 69
- 14. Conclusionesp. 70
- 15. Cronograma de actividadesp. 71
- 16. Presupuestop. 73
- Referencias bibliográficasp. 75
- Apéndice Ap. 82
- Apéndice Bp. 83
- Figura 1. Cálculo tamaño de muestrap. 27
- Figura 2. Cebadores VPH-ARp. 37
- Figura 3. Cantidad de muestras recolectadasp. 41
- Figura 4. Datos ginecológicosp. 43
- Figura 5. Uso de métodos anticonceptivosp. 44
- Figura 6. Resultados carga viral VPH-16p. 55
- Figura 7. Resultados carga viral VPH-31p. 56
- Figura 8. Resultados carga viral VPH-33p. 57
- Figura 9. Resultados transcriptos RPP30p. 62
- Figura 10. Resultados electroforesis para B-tubulinap. 63
- Figura 11. Presupuestop. 74
- Tabla 1. Cálculo tamaño de muestrap. 26
- Tabla 2. Variables del estudiop. 28
- Tabla 3. Tamaño de cebadoresp. 36
- Tabla 4. Medidas estadísticas edadp. 42
- Tabla 5. Resultados citologíap. 45
- Tabla 6. Resultados biopsiap. 45
- Tabla 7. Asociación de variables cuantitativas con resultado de biopsia alteradap. 47
- Tabla 8. Asociación de variables dicotómicas con resultado de biopsia alteradap. 48
- Tabla 9. Categorías concordantes entre citología y biopsiap. 49
- Tabla 10. Análisis de concordancia citología y biopsiap. 50
- Tabla 11. Desempeño diagnóstico citología frente a biopsiap. 51
- Tabla 12. Distribución de genotipos de VPHp. 52
- Tabla 14. Genotipos según categoría de biopsiap. 58
- Tabla 15. Variables sociodemográficas y ginecoobstétricas contra carga viral de VPH-16p. 60
- Tabla 16. Matriz 2×2 de la PCR para VPH de alto riesgo frente al diagnóstico histopatológicop. 61
- Tabla 17. Cronograma de actividades marzo 2023 a septiembre 2024p. 71
- Tabla 18. Cronograma de actividades octubre 2024 a noviembre 2025p. 73
- Apéndice Ap. 82
- Apéndice Bp. 83