Bogotá - Ciencias - Doctorado en Ciencias - Química · 2026
Diseño, síntesis y evaluación de péptidos derivados de lectinas vegetales para el reconocimiento de antígenos T, Tn y sTn
Los antígenos T, Tn y sTn son moléculas que se encuentran asociadas a alteraciones en las proteínas presentes en la superficie celular, estos cambios se encuentran asociados a modificaciones durante el proceso de biosíntesis de los glicoconjugados y generalmente, son asociadas al desarrollo de una amplia variedad de tipos de cáncer. Durante los últimos años se ha estudiado la posibilidad de utilizar estos antígenos como biomarcadores potenciales para el desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico temprano y tratamientos contra el cáncer. En este contexto, varios investigadores han reportado la afinidad que tienen las lectinas por glicopéptidos que llevan estos antígenos con el propósito de desarrollar metodologías para el diagnóstico de la enfermedad, en algunos casos se puede distinguir entre tipos de cáncer. En este proyecto se diseñarán y sintetizarán secuencias peptídicas derivadas de lectinas vegetales que reconozcan los antígenos T, Tn y sTn, así mismo, se evaluara la actividad in vitro de las secuencias peptídicas obtenidas y se comparan los resultados obtenidos con los de las lectinas precursoras de las secuencias peptídicas. Se espera que los resultados del presente proyecto contribuyan significativamente a identificar secuencias peptídicas responsables del reconocimiento de los antígenos T, Tn y sTn que permitan el desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico temprano del cáncer. (Texto tomado de la fuente)
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Contenido
- Introducciónp. 21
- Marco teóricop. 24
- Generalidadesp. 24
- Glicosilación y cáncerp. 26
- Antígenos asociados a cáncerp. 29
- Antígeno Tnp. 29
- Antígeno sTnp. 30
- Antígeno Tp. 31
- Lectinasp. 33
- Clasificación de lectinasp. 34
- Estructura de las lectinasp. 36
- Bases estructurales del reconocimiento lectina–carbohidratop. 39
- Aplicaciones modernas de las lectinas vegetalesp. 41
- Diseño de moléculas peptídicasp. 42
- Péptidos terapéuticosp. 42
- Diseño racional de péptidosp. 43
- Métodos computacionales aplicados al diseño racional de péptidosp. 45
- Estado del artep. 47
- Lectinas como herramientas para el reconocimiento de antígenos T, Tn y sTnp. 47
- Implicaciones para el diseño de péptidos derivados de lectinasp. 50
- Estrategias alternativas de reconocimiento de antígenos T, Tn y sTnp. 51
- Hipótesisp. 54
- Diseño experimentalp. 55
- Objetivosp. 58
- Objetivo Generalp. 58
- Objetivos específicosp. 58
- Metodologíap. 59
- Análisis bioinformático de lectinas leguminosas y diseño racional de péptidosp. 59
- Análisis de la estructura terciaria y superposición molecularp. 61
- Diseño racional de péptidos derivados de lectinas vegetalesp. 61
- Evaluación por docking molecularp. 62
- Síntesis de péptidos en fase sólidap. 64
- Ensayo de hemólisis en eritrocitos humanos O⁺p. 65
- Preparación de eritrocitos humanos A, T y Tn para ensayos de aglutinaciónp. 66
- Ensayos de aglutinación eritrocitariap. 67
- 6.1.10 Ensayos de inhibición por carbohidratosp. 67
- 6.1.11 Evaluación de las secuencias peptídicas mediante ensayo de ELLSAp. 68
- 6.1.12 Ensayos en líneas celulares (Citotoxicidad)p. 69
- Resultados y discusiónp. 70
- Selección de lectinas vegetalesp. 70
- Identificación de regiones relevantes en las interacciones lectina-antígenop. 71
- Análisis de la estructura terciaria y superposición molecularp. 61
- Análisis de las interacciones lectina-antígenop. 76
- Análisis de la lectina Vatairea macrocarpa con el antígeno Tnp. 77
- Análisis de la lectina Arachis hypogaea (PNA) con el antígeno Tp. 78
- Análisis de la lectina Vicia Villosa (VVA-B4) con el antígeno Tnp. 80
- Análisis de la lectina Psophocarpus tetragonolobus (WBA) con el antígeno Tnp. 82
- Análisis de la lectina Glicine Max (SBA) con el antígeno Tnp. 83
- Consideraciones del análisis de las interacciones lectina-antígenop. 85
- Diseño racional de péptidos derivados de lectinas vegetalesp. 61
- Secuencia peptídica consensop. 87
- Librería de péptidos derivados de la secuencia consensop. 89
- molecularp. 92
- molecularp. 96
- molecularp. 99
- molecularp. 102
- molecularp. 106
- molecularp. 109
- lectinas y los antígenos Tn, sTn y Tp. 112
- Síntesis de péptidos en fase sólidap. 64
- Caracterización cromatográfica por RP-HPLCp. 115
- Caracterización por espectrometría de masas MALDI-TOFp. 119
- Evaluación funcional in vitro de péptidos derivados de lectinas vegetalesp. 122
- Evaluación de la actividad de péptidos derivados de lectinas vegetalesp. 123
- Evaluación de la actividad hemoaglutinante de P1 con eritrocitos tipo A, Tn y Tp. 124
- Evaluación de la actividad hemoaglutinante de P2 con eritrocitos tipo A, Tn y Tp. 126
- Evaluación de la actividad hemoaglutinante de P3 con eritrocitos tipo A, Tn y Tp. 128
- Evaluación de la actividad hemoaglutinante de P6 con eritrocitos tipo A, Tn y Tp. 131
- Ensayos de inhibición por carbohidratosp. 67
- 7.10.1 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P1 y eritrocitos tipo Ap. 134
- 7.10.2 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P1 y eritrocitos tipo Tnp. 135
- 7.10.3 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P1 y eritrocitos tipo Tp. 137
- 7.10.4 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P2 y eritrocitos tipo Ap. 139
- 7.10.5 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P2 y eritrocitos tipo Tnp. 141
- 7.10.6 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P2 y eritrocitos tipo Tp. 142
- 7.10.7 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P3 y eritrocitos tipo Ap. 144
- 7.10.8 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P3 y eritrocitos tipo Tnp. 145
- 7.10.9 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P3 y eritrocitos tipo Tp. 147
- 7.10.10 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P6 y eritrocitos tipo Ap. 149
- 7.10.11 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P6 y eritrocitos tipo Tnp. 150
- 7.10.12 Ensayos de inhibición por carbohidratos para P6 y eritrocitos tipo Tp. 152
- el antígeno Tnp. 154
- Discusión de los resultados del ensayo ELLSAp. 156
- celulares tumoralesp. 158
- 7.13.1 Evaluación de biocompatibilidad en fibroblastos de los péptidos P1, P2, P3 y P6p. 158
- vegetales: comparación con lectinas y sistemas afines reportados en la literaturap. 168
- 7.14.1 Criterios de comparación y alcance del análisisp. 169
- 7.14.2 Comparación con lectinas vegetalesp. 170
- glicanos tumoralesp. 172
- de antígenos O-glicosilados asociados a cáncerp. 174
- Conclusiones y recomendacionesp. 177
- Conclusionesp. 177
- Recomendacionesp. 180
- de lectinas candidatasp. 183
- Anexo B: Seguimiento a SPPS de péptidos derivados de lectinas vegetalesp. 186
- Anexo C: Representación gráfica complementaria de los resultados del ensayo ELLSAp. 190
- Bibliografíap. 185
- en 2022 [1]p. 24
- Figura 1.2. Tasa de mortalidad por Cáncer a nivel mundial, ambos sexos, en 2022. [1]p. 25
- Figura 1.3. Unión de azucares a proteínas [38] a. O-glicosilación; b. N-glicosilaciónp. 27
- acetilglucosaminiltransferasap. 28
- treonina; b. Representación simplificada del enlace α-1-O característico del antígeno Tnp. 30
- al antígeno Tn y su anclaje O-glicosídico al residuo Ser/Thrp. 31
- residuo Ser/Thrp. 32
- Protein Data Bank (código de acceso 1GZ9) [16]p. 38
- respectivamentep. 39
- GalNAc en los complejos lectina-carbohidratop. 72
- Figura 7.3. Dendrograma jerárquico entre lectinas vegetales basado en valores de RMSDp. 76
- carbohidrato; d. Interacciones entre la lectina y el antígeno Tnp. 78
- carbohidrato; d. Interacciones entre la lectina y el antígeno Tp. 79
- carbohidrato; d. Interacciones entre la lectina y el antígeno Tnp. 81
- carbohidrato; d. Interacciones entre la lectina y el antígeno Tnp. 82
- carbohidrato; d. Interacciones entre la lectina y el antígeno Tnp. 84
- antígeno Tn; b. antígeno sTn; c. antígeno Tp. 94
- antígeno Tn; b. antígeno sTn; c. antígeno Tp. 97
- antígeno Tn; b. antígeno sTn; c. antígeno Tp. 100
- antígeno Tn; b. antígeno sTn; c. antígeno Tp. 104
- antígeno Tn; b. antígeno sTn; c. antígeno Tp. 107
- antígeno Tn; b. antígeno sTn; c. antígeno Tp. 110
- desempeño en SPPSp. 117
- desempeño en SPPSp. 118
- Figura 7.17. Espectrometría de masas para péptidos P1, P2, P3 y P6p. 120
- Figura 7.18. Espectrometría de masas para los péptidos P4 y P5p. 121
- tipo Tn (D, E, F) y eritrocitos tipo T (G, H, I)p. 125
- tipo Tn (D, E, F) y eritrocitos tipo T (G, H, I)p. 127
- tipo Tn (D, E, F) y eritrocitos tipo T (G, H, I)p. 130
- tipo Tn (D, E, F) y eritrocitos tipo T (G, H, I)p. 132
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 135
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 136
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 138
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 140
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 142
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 143
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 145
- glucosa. La concentración de los carbohidratos es 0.1Mp. 146