Biología · 2024
EVALUACIÓN DE LA PRODUCCIÓN Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE Y CITOTÓXICA DE EXOPOLISACÁRIDOS OBTENIDOS BAJO CULTIVO SUMERGIDO DE DOS CEPAS SILVESTRES DE Schizophyllum radiatum Fr.
Los exopolisacáridos (EPS) son un grupo de macromoléculas producidas por hongos, bacterias y plantas, con diversidad de estructuras y reporte de actividades biológicas como anticancerígenas, antivirales, inmunomoduladoras, antimicrobianas, anticoagulantes, antidiabéticas, antioxidantes y antitumorales. Los EPS producidos por macrohongos han atraído la atención mundial debido a sus propiedades físicas y químicas tales como su naturaleza antigénica, anticoagulantes, estabilizantes de emulsiones, formadores de biopelículas para alimentos, agentes gelificantes, agentes hidratantes, estabilizantes de espumas, formadores de fibras y agentes viscosantes, entre otros. La mejor forma de obtener EPS es bajo cultivo sumergido debido a que esta técnica permite un mayor control de variables como el pH, agitación, temperatura, factores de contaminación y, además tiene un bajo costo. Así mismo, la producción de estos compuestos se ha centrado en cepas comerciales dejando a un lado y siendo poco exploradas las cepas silvestres. Por lo tanto, esta investigación tuvo como objetivo evaluar la producción y actividad antioxidante y citotóxica de exopolisacáridos de dos cepas silvestres de Schizophyllum radiatum Fr. obtenidos en cultivo sumergido, así mismo establecer los parámetros de productividad y rendimiento de EPS a partir de esas cepas. Los resultados indicaron valores de 6,89 ± 0,36 g/L y 7,31 ± 0,35 g/L para la producción de EPS y 12,61 ± 3,40 y 9,96 ± 0,74 para la producción de biomasa. La actividad antioxidante de los EPS frente a los radicales ABTS y DPPH, mostraron valores de 10,82 ± 0,99 y 10,96 ± 5,76 % para las cepas. En cuanto a la actividad citotóxica, la viabilidad celular se mantuvo por encima del 82 % en todas las concentraciones y en ambas cepas. Los resultados obtenidos revelan que estos polisacáridos aislados de cepas silvestres de un macrohongo que habita en el departamento del Tolima tienen el potencial para servir como aditivos naturales en productos alimenticios, farmacéuticos, cosméticos de manera segura y efectiva en su actividad biológica.
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Contenido
- INTRODUCCIÓNp. 13
- OBJETIVOSp. 16
- 2.1. OBJETIVO GENERALp. 16
- 2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOSp. 16
- MARCO TEORICOp. 17
- 3.1. MACROHONGOSp. 17
- 3.2. FILO BASIDIOMYCOTAp. 20
- 3.3. Schizophyllum radiatum Fr. 1851p. 21
- 3.4. POLISACÁRIDOSp. 25
- 3.6. EXOPOLISACÁRIDOSp. 31
- 3.7. EXOPOLISACÁRIDOS PRODUCIDOS POR S. radiatum pp. 33
- 3.8. ACTIVIDAD CITOTÓXICAp. 34
- 3.9. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTEp. 35
- 3.10. CULTIVO SUMERGIDOp. 37
- 3.11. FUENTE DE CARBONO Y NITROGENOp. 37
- 3.12. TEMPERATURA Y pHp. 39
- 3.13. INÓCULOp. 39
- 3.14. AGITACIÓN Y AIREACIÓNp. 40
- METODOLOGÍAp. 41
- 4.1. COLECTA DE ORGANISMOSp. 41
- 4.2. ACTIVACIÓN DE MICELIOp. 41
- 4.3. OBTENCIÓN DE EXOPOLISACÁRIDOS EN CULTIVO SUMERGIDOp. 41
- 4.4. EXTRACCIÓN DEL EXOPOLISACÁRIDOp. 44
- Determinación de la biomasap. 44
- 4.4.2. Determinación de peso seco del exopolisacáridop. 44
- 4.5. PURIFICACIÓN DEL EXOPOLISACÁRIDOp. 44
- 4.6. LIOFILIZACIÓN DEL EXOPOLISACÁRIDOp. 45
- 4.8. SOLUBILIZACIÓN DEL EXOPOLISACÁRIDOp. 46
- 4.9. DETERMINACIÓN PUREZA DEL EXOPOLISACÁRIDOp. 46
- 4.11. ACTIVIDAD CITOTÓXICAp. 34
- 4.12. ACTIVIDAD ANTIRRADICALARIA DE EXOPOLISACÁRIDOSp. 51
- 4.13. ANALISIS DE DATOSp. 52
- RESULTADOS Y DISCUSIÓNp. 53
- 5.1. RENDIMIENTO DE EXOPOLISACÁRIDOSp. 53
- 5.2. DETERMINACIÓN PUREZA DE EXOPOLISACÁRIDOSp. 57
- 5.4. VISCOSIDADp. 49
- 5.5. ACTIVIDAD BIOLÓGICAp. 11
- CONCLUSIONESp. 75
- REFERENTESp. 76
- ANEXOSp. 86
- (bacterias y hongos) con sus características y aplicaciones286
- Tabla. 3 Composición del medio de cultivop. 41
- Tabla. 5 Reactivos para determinar proteínas por medio del método Folin Lowryp. 47
- Tabla. 6 Pureza de exopolisacáridos expresada en porcentajep. 60
- de Dispersión de energía (EDS)p. 63
- Tabla. 8 Viscosidad aparente de los exopolisacáridos en g/Lp. 65
- Tabla. 9 Viabilidad celular expresada en porcentaje por el método MTT en sangre688
- Tabla. 10 Actividad inhibitoria del radical ABTS expresada en porcentaje712
- Tabla. 11 Actividad inhibitoria sobre el radical DPPH expresada en porcentajep. 74
- Figura. 1 Metabolitos bioactivos producidos por macrohongos y sus aplicacionesp. 18
- branquias himeniales)p. 22
- (A. películo, B. contexto, C. longitud branquial, D. pelos abhimeniales)p. 24
- Figura. 4 Esporas de Schizophyllym radiatum Frp. 25
- Figura. 5 Cepa asilada Schizophyllum radiatum Frp. 41
- S. radiatum en cultivo sumergido y la determinación de la actividad biológicap. 43
- Figura. 7 Exopolisacárido suspendido en etanol al 98%p. 45
- Figura. 8 Exopolisacárido liofilizadop. 45
- Figura. 9 Solubilización del polímero en NaOHp. 46
- tratamientos de la cepa silvestre Schizophyllum radiatum Fr. (S-05)p. 54
- tratamientos de la cepa silvestre Schizophyllum radiatum Fr. (S-030)p. 55
- silvestre Schizophyllum radiatum Fr. (S-05)p. 56
- silvestre Schizophyllum radiatum Fr. (S-030)p. 57
- Figura. 14 Espectro FT-IR de exopolisacáridos producidosp. 61
- aumentos diferentesp. 64
- radiatum Fr. (S-05)p. 66
- radiatum Fr. (S-030)p. 67
- Figura. 18 Viabilidad celular de la cepa silvestre Schizophyllum radiatum Fr. (S-05)p. 69
- Figura. 19 Viabilidad celular de la cepa silvestre Schizophyllum radiatum Fr. (S-030)p. 70
- radiatum Fr. (S-05)p. 66
- radiatum Fr. (S-30)p. 73