Bacteriología y Laboratorio Clínico · 2018
Evaluación de Rizobacterias solubilizadoras de fosfato aisladas de Bosque Alto Andino para uso en restauración ecológica del corredor Chingaza-Sumapaz
En Colombia se ha reconocido el uso inadecuado de los suelos moderadamente fértiles localizados en zonas urbanas, donde la técnica agrícola es la base principal de explotación y sustento diario; a su vez el uso indiscriminado de pesticidas, herbicida y fertilizantes han contribuido a la erosión y daño progresivo del suelo. Es allí donde nace la necesidad de implementar herramientas para la conservación y preservación de ecosistemas, método que actualmente se conoce como restauración ecológica. El propósito del presente proyecto es la evaluación de rizobacterias solubilizadoras de fosfato con capacidad PGPR (Plant Growth-Promoting Rhizobacteria) aisladas del suelo de la Universidad Antonio Nariño sede Usme (Corredor Chingaza-Sumapaz) y de Bosque Alto Andino, en medios de cultivo selectivos identificados como SMRS-1, PSM y Pikovskaya con el objetivo de usarlas en el crecimiento de las plantas Tibar (Escallonia paniculata) y Raque (Vallea stipularis) usadas frecuentemente para restauración ecológica. Se lograron aislar 44 cepas, las cuales se clasificaron mediante pruebas cualitativas (método fosfatasas) y cuantitativas (producción AIA (Ácido indol acético)) para identificar su actividad PGPR, se usaron en la preparación del inóculo el cual posteriormente se utilizó sobre las plantas Tibar (Escallonia paniculata) y Raque (Vallea stipularis) bajo condición de vivero reconociendo la capacidad de estimular el crecimiento y desarrollo de la población vegetal, evaluado a partir del uso de variables (altura, número hojas y grosor tallo) analizadas por medio del método estadístico de varianza simple ANOVA. Los microorganismos fueron identificados como E. cloacae, P. agglomerans y S. marcescens.
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Contenido
- RESUMENp. 11
- INTRODUCCIÓNp. 12
- 1. OBJETIVOSp. 13
- 1.1 Objetivo generalp. 13
- 1.2 Objetivos específicosp. 13
- 2. ANTECEDENTESp. 14
- 3. MARCO TEÓRICOp. 21
- 3.1. Restauración ecológicap. 21
- 3.2. Bosque Alto Andinop. 22
- 3.3 Problemática de los Bosques Altos Andinosp. 24
- 3.4 Rizobacteriasp. 25
- 3.5. El fósforo como nutriente y su importanciap. 27
- 3.6. Presentación del fósforo en el suelop. 28
- 3.7. Ciclo de Fósforop. 30
- 3.8. Solubilización de fosfato una nueva alternativa biológicap. 31
- 3.9 Enzimas Fosfatasasp. 35
- 3.10 Enzimas Fitasasp. 35
- 3.11 Banco de cepasp. 36
- 3.12 Screening microbianop. 37
- 3.13 Viabilidad y purezap. 38
- 3.14 Evaluación y técnicas de promotores del crecimiento vegetal (PGPR)p. 38
- 3.15. Actividad Solubilizadora de Fósforop. 39
- 3.16. Técnicas de Bioensayo en viverop. 41
- 3.17 Árboles forestales uso en ensayos de restauraciónp. 41
- 3.17.1 Descripción vegetalp. 41
- 3.17.2 Vallea stipularisp. 42
- 3.17.3 Escallonia paniculatap. 44
- 4.1. Tipo de investigación y enfoquep. 46
- 4.1.1. Enfoquep. 46
- 4.2. Universo, población y muestrap. 46
- 4.2.1. Universop. 46
- 4.2.2. Poblaciónp. 46
- 4.2.3. Muestrap. 66
- 4.3. Hipótesis, variables, indicadoresp. 46
- 4.3.1. Hipótesis de investigaciónp. 46
- 4.3.2. Variablesp. 47
- 4.3.3. Indicadoresp. 47
- 4.4 Técnicas y procedimientosp. 47
- 4.4.1 Muestreo del suelop. 47
- 4.4.2.1 Aislamiento de bacterias solubilizadoras de fosfatop. 49
- 4.4.2.2 Screening de selecciónp. 50
- 4.4.2.3 Conservación de las cepasp. 50
- 4.4.2.3 Evaluación de Viabilidad y Purezap. 50
- 4.4.2.4 Evaluación de la actividad solubilizadora de fosfatop. 51
- 4.4.2.5 Ensayo de AIA (Ácido Indol Acético)p. 52
- 4.4.2.6 Pruebas de identificación de PGPRp. 52
- 4.4.2.7 Realización de preinóculos y curva de crecimientop. 53
- 4.4.2.8 Fase II. Evaluación de tratamientos inoculados a escala de viverop. 53
- 4.4.2.9. Bioensayo a escala de viverop. 54
- 4.4.2.10 Diseño del experimento en viverop. 55
- 4.4.2.11 Análisis de datosp. 56
- 5. RESULTADOSp. 57
- 5.1 Fase I. Aislamiento y caracterización de rizobacterias solubilizadoras de fosfatop. 57
- 5.1.1 Codificación y evaluación de microorganismos solubilizadores de fosfatop. 64
- 5.1.2 Evaluación de la actividad solubilizadora de fosfatop. 51
- 5.1.3 Ensayo de AIA (Ácido Indol Acético)p. 52
- (PGPR)p. 69
- 5.1.5 Fase II. Evaluación de tratamientos inoculados a escala de vivero inóculos y curvap. 71
- 5.1.6 Bioensayo en viverop. 75
- 5.1.8 Análisis de datos estadísticos de varianzap. 80
- 5.1.8.1 Altura Tibar (Escallonia paniculata)p. 80
- 5.1.8.2 Número de hojas planta Tibar (Escallonia paniculata)p. 82
- 5.1.8.3 Grosor del tallo planta Tibar (Escallonia paniculata)p. 84
- 5.1.8.4 Altura planta Raque (Vallea stipularis)p. 86
- 5.1.8.5 Número de hojas planta Raque (Vallea stipularis)p. 88
- 5.1.8.6 Grosor de tallo planta Raque (Vallea stipularis)p. 90
- 6. DISCUSIÓNp. 92
- 7. CONCLUSIONESp. 97
- 8. RECOMENDACIONESp. 98
- 9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICASp. 99
- ANEXOS………………………………………………………p. 109
- Figura 4. Ubicación astronómica del Bosque Alto Andino, Sede Usme UAN…………p. 47
- Especie # 2. ……………………………………………………………………………………p. 55
- #2………………………………………………………………………………………………p. 59
- Figura 10. Caracterización morfológica en el medio SMRS-1 para el muestreo # 2…………p. 60
- Figura 11. Caracterización morfológica en el medio Pikovskaya para el muestreo # 2………p. 61
- Figura 13. Índice de solubilización de las cepas trabajadas y controles en medio NBRIP……p. 65
- Figura 17. Curva de crecimiento cepa RBSF 23………………………………………………p. 70
- Figura 18. Curva de crecimiento cepa RBSF 37………………………………………………p. 71
- Figura 19. Curva de crecimiento cepa RBSF 40………………………………………………p. 71
- Figura 20. Curva de crecimiento cepa RBSF 46………………………………………………p. 72
- Figura 23. Inoculación de las plantas según los tratamientos…………………………………p. 74
- RBSF 21 planta Raque…………………………………………………………………………p. 76
- desviación estándar con respecto a la media……………………………………………p. 77
- varianza para Altura a lo largo del tiempo entre los diferentes tratamientos y control…...……p. 78
- desviación estándar con respecto a la media……………………………………………p. 79
- tiempo y control. C. Tablas de análisis de varianza……………………………………………p. 82
- Tabla 1. Formas de fósforo inorgánico en el suelo……………………………………p. 28
- fosfatosp. 30
- Tabla 11. Tamaño de los halos de solubilización e índice de solubilización…………………p. 64