Biología · 2026
Identificación molecular de microorganismos epífitos susceptibles y resistentes a descontaminación por ozonización asociados a inflorescencias de Cannabis spp grado farmacéutico
El cannabis ha cobrado relevancia por sus compuestos con potencial medicinal y es destinado especialmente a pacientes inmunocomprometidos. Por esto, la industria implementa estrictos límites de carga microbiana. Para cumplir con estas medidas y reducir riesgos, se emplean métodos de descontaminación como el ozono (O₃), sin embargo, los métodos de inocuización no siempre son 100% efectivos. En este estudio se identificaron molecularmente hongos presentes en inflorescencias de cannabis antes y después de la ozonización, evaluando métodos de extracción de ADN y amplificación de la región ITS para su secuenciación e identificación. Se encontraron especies en su mayoría oportunistas como Rhodotorula mucilaginosa, Rhizopus microsporum y Penicillium manginii. Además, se observó una diversidad de hongos ligeramente más alta tras la ozonización del cannabis, aunque en general fue baja según el índice de Shannon-Wiener. El protocolo de ozonización al que se somete el cannabis no mostró efectos significativos sobre los hongos analizados (P > 0,05).
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Contenido
- AGRADECIMIENTOSp. 3
- TABLA DE CONTENIDOp. 4
- LISTA DE FIGURASp. 5
- LISTA DE TABLASp. 5
- RESUMENp. 6
- ABSTRACTp. 6
- INTRODUCCIÓNp. 7
- OBJETIVOSp. 11
- GENERAL:p. 11
- ESPECÍFICOS:p. 11
- MATERIALES Y MÉTODOSp. 11
- LUGAR DE MUESTREOp. 11
- OBTENCIÓN DE MUESTRASp. 11
- CULTIVO MICROBIOLÓGICO DE MUESTRASp. 11
- EXTRACCIÓN DE ADN Y EVALUACIÓN DEL MEJOR MÉTODOp. 12
- EXTRACCIÓN MÉTODO SDSp. 12
- AMPLIFICACIÓN DE FRAGMENTOS ITS MEDIANTE PCRp. 13
- ELECTROFORESISp. 13
- LIMPIEZA DE PRODUCTO DE PCR (EXOSAP-IT™)p. 14
- REACCIÓN DE SECUENCIACIÓN (KIT BIGDYE DIRECT)p. 14
- LIMPIEZA DE REACCIÓN DE SECUENCIACIÓN (KIT XTERMINATOR™)p. 14
- ANÁLISIS DE DATOSp. 14
- RESULTADOSp. 15
- DESARROLLO DEL MÉTODO DE IDENTIFICACIÓN MOLECULARp. 15
- CALIDAD DEL ADN EXTRAÍDO MEDIANTE EL MÉTODO SDSp. 19
- SECUENCIACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE ESPECIESp. 21
- RIQUEZA DE ESPECIES EN PRECOSECHA Y EN OZONIZADOp. 22
- SPPp. 23
- INFLORESCENCIAS DE CANNABISp. 24
- DISCUSIÓNp. 24
- CONCLUSIONESp. 29
- RECOMENDACIONES Y PERSPECTIVASp. 30
- BIBLIOGRAFÍAp. 30
- ANEXOSp. 37
- MÉTODO CTABp. 37
- 41, RESPECTIVAMENTE. ESCALA 0.7X, 1.0Xp. 37
- INFLORESCENCIAS DE CANNABIS CON CORRECCIÓN FDRp. 39
- kits enzimaticosp. 16
- PCR y el efecto de la adición de DMSO en estap. 16
- B. #24p. 18
- mediante el método SDSp. 19
- mediante el método SDSp. 19
- Figura 7 Riqueza de hongos en muestras de precosecha y ozonizado en Cannabisp. 22
- secuencias incluyendo el tallo M13p. 13
- squash-PCRp. 19
- momentosp. 23